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I - Coleta: é realizada no centro obstétrico imediatamente após o nascimento do bebê, onde coleta-se aproximadamente 100 ml de sangue do cordão umbilical e placentário (SCUP). O sangue é puncionado das veias e artéria umbilical e também da placenta após sua dequitação. Posteriormente é encaminhado ao CCB para processamento e criopreservação. Esse transporte é feito em recipiente térmico especial, que se mantém entre 4º e 20º C. A bolsa é monitorizada por termômetro digital computadorizado que registra a temperatura de todo o trajeto, sendo o prazo máximo de transporte de até 48 horas.

II - Processamento: é feita uma avaliação criteriosa do material coletado. Após a contagem de células, (deve ser maior que 500 milhões de células) e constatação da viabilidade celular, é feita uma redução volumétrica do material através da separação celular por centrifugações (a primeira centrifugação 1000 rpm a 4º C por 7 minutos e a segunda centrifugação 1500 rpm a 4º C por 14 minutos). Análises laboratoriais são feitas tanto no SCUP como no sangue da mãe, para o diagnóstico de eventuais doenças. Serão analisadas as seguintes patologias na mãe: hepatite B e C, HIV, Sífilis, Chagas e HTLV I e II. Para o SCUP será feita a cultura microbiológica para bactérias aeróbicas, anaeróbicas e fungos. A dosagem do CD34+ certifica a presença de células viáveis para futuro transplante.

III - Congelamento: utiliza-se uma solução com volumes iguais de DEXTRAN e DMSO, Heparina Sódica para proteção das células que serão criopreservadas. Após este procedimento, transfere-se as células e o líquido protetor para uma bolsa própria para criogenia. Através de um congelador computadorizado (Nicool) realiza-se o congelamento programado das células-tronco levando-as a uma temperatura de -110° C em média 70 minutos. Esta bolsa, que está protegida por um envelope de alumínio (cânister), é então transferida para um container de vapor de nitrogênio, na qual ficará estocado por um período suficiente para obtenção dos laudos laboratoriais. Após a liberação final do SCUP o cânister será imerso em nitrogênio liquido a -196°C onde poderá ficar por tempo indeterminado. São armazenados também batoques (tubos de 2 ml) para futuros testes de compatibilidade para uso em familiares.

 
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